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常用方法:从经特定抗原刺激的动物体内抽取浆细胞,再与骨膸瘤细胞融合,经两次筛选即可获得杂交瘤细胞,然后进行克隆化培养,即可获得细胞产物----单克隆抗体.

1.对小鼠注射特定的抗原蛋白,使小鼠产生免疫反应; 2.得到相应的B淋巴细胞; 3.. 从细胞培养液或小鼠腹水中,就可以提取出大量的单克隆抗体了!

单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体.通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和.

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免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠.免疫的方法取决于所用抗原的性质.免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法. 2)骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞.

制备单克隆抗体的原理是杂交瘤细胞,既具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,又能分泌一种特异性抗体

要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞,但这种B淋巴细胞不能在体外生长.而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖,应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一,得到杂种的骨髓瘤细胞.这种杂种细胞继承两种亲代细胞的特性,它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性,也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性,用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群,可制备抗一种抗原决定簇的特异单克.

哈哈~我们刚考到这题 原理: B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力.B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的.将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,再进一步克隆化,这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力,又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力,将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入.

单克隆抗体制作简要步骤:1,抗原准备;2,动物免疫;3,B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合;4,杂交瘤细胞的筛选;5,阳性杂交细胞克隆化;6,大规模单克隆抗体的制备.

制备时是用B细胞,实际融合的是效应B细胞

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