去百度文库,查看完整内容> 内容来自用户:744410040 培养细胞的冷冻保存与复苏 概述 | 冻存过程 |  冷冻保存与复苏的原理 | 冻存结果 |  冷冻速率 | 讨论 |  .

途威液氮罐专家解答:细胞冻存是细胞保存的主要方法之一.利用冻存技术将细胞置于零下196~C液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来.

细胞冻存是将细胞放在低温环境,减少细胞代谢以便长期储存的一种找术.其好处是可以存储自己免疫能力比较好的细胞为以后的健康做储备.

低温保存细胞的原理,冷冻保护剂可以均匀充分地和细胞相接触,保护效果好.对组织而言,保护剂只能作用于其表面,对深层细胞无法起到保护作用.为了提高组织的存.

冻存的原则是:慢冻,主要是防止细胞在冷冻过程中形成冰晶,对细胞造成损害,加dmso也是这个原理.复苏细胞的原则是:快融.主要是防止dmso在液体状态下对细胞的毒害作用,快速使细胞进入复苏和生长状态.因此,细胞的冻存与复苏原则应该是慢冻快融.分别经过4度,-20度,-80度和液氮的依次过程进行冻存;经过37度水浴1分钟之内解冻细胞冻存液进行复苏.

注意:将细胞悬浮好之后,再加入DMSO,加入DMSO后,马上悬浮细胞,系入冻存管.4度过夜,放入液氮;如果没有液氮,-80度冻细胞不好

1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;2. 取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗.3. 去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面).

因为冰冻时 酶的活性减低 代谢减慢 所以不易被破坏 但冰冻就了 使细胞所需能量供应不上 然则死亡

冻结细胞使细胞生命活动停止,像蛙类冬眠,目前这种办法还未成功 想了解更多不会找百度啊

细胞中的水凝结成冰,体积变大了,硬度变大了,将细胞撑破了 就这么简单